193- Imagerie confocale in vivo : observation en temps réel des réactions tissulaires induites par l’acupuncture

Étude expérimentale animale

L'étude

Objectif

L’étude applique l’imagerie confocale in vivo — une microscopie optique à focalisation sélective permettant une observation fine et tridimensionnelle des tissus vivants — afin d’observer en temps réel les modifications morphologiques et microcirculatoires induites par l’acupuncture dans le tissu conjonctif sous-cutané.
Elle vise à dépasser les limites de l’histologie classique, qui ne saisit que des images statiques, pour offrir une vision dynamique et quantifiable des effets mécaniques de la stimulation acupuncturale.

Méthode

Huit rats Sprague-Dawley recoivent une injection intraveineuse de fluorescéine sodique (1 %, 0,1 mL/100 g) avant une séance d’électroacupuncture (36E ou 34VB, intensité 1 mA, fréquence 2/15 Hz, durée 5 min).
L’observation est réalisée au moyen d’un microscope confocal à balayage laser in vivo (pCLE, Optiscan ViewnVivo B30), offrant une résolution spatiale de 0,5 µm et une résolution temporelle de 3,5 images par seconde, avec une profondeur d’exploration de 400 µm.
Les images ont été analysées à l’aide de logiciels spécialisés (ImageJ) pour :

• suivre la vitesse des globules rouges (microcirculation) ;
• quantifier l’orientation des fibres de collagène (matrice extracellulaire).

Résultats

Les enregistrements montrent une augmentation progressive de la vitesse des globules rouges dans les capillaires dès la première minute après la stimulation puis une réorganisation des fibres de collagène en faisceaux parallèles et ordonnés (figure 1).
Ces observations traduisent une réponse tissulaire biphasique caractérisée par une activation microcirculatoire précoce suivie d'un remodelage conjonctif au sein de la matrice extracellulaire.

Figure 1. Observation en temps réel des effets tissulaires de l’acupuncture par imagerie confocale in vivo (Xiong et al., 2025).

(A) Microcirculation : séquence d’images confocales prises à 0 s, 80 ms et 160 ms montrant le déplacement des globules rouges (RBC, red blood cells) dans les capillaires. Le diagramme associé indique l’évolution de la vitesse moyenne du flux sanguin avec une augmentation progressive après stimulation acupuncturale.

(B, C) Matrice structurelle : analyse directionnelle des fibres de collagène avant et après acupuncture. Le plugin Directionality d’ImageJ calcule l’orientation moyenne des fibres à partir de leur réflexion du laser confocal  la zone colorée correspond à la région analysée et l’histogramme indique la répartition angulaire. Une distribution large traduit un réseau désordonné (B), tandis qu’une distribution étroite et centrée révèle un alignement progressif des fibres (C), signe de remodelage conjonctif sous acupuncture.

Conclusion

Cette approche fournit un outil de mesure objectif des réponses mécaniques locales à l’acupuncture et pourrait être étendue à d’autres stimulations physiques telles que la moxibustion.

Commentaires

Un domaine de recherche majeur en acupuncture concerne l’étude des réactions locales — tissulaires, cellulaires et moléculaires — qui se produisent au niveau du point d’acupuncture au contact de l’aiguille. Ces travaux cherchent à comprendre comment une stimulation mécanique locale se transforme en signal nerveux, autrement dit le processus de transduction du signal mécanique. L’enjeu est de préciser les mécanismes initiaux par lesquels la stimulation d’un point d’acupuncture déclenche une réponse physiologique mesurable [2, 3].

L’imagerie confocale in vivo permet d’observer directement les réactions tissulaires au moment de la stimulation ce qu’aucune technique histologique ne permettait jusqu’ici. Cette application constitue une avancée méthodologique notable dans la compréhension des effets physiques de l’acupuncture.

Qu’est-ce que l’imagerie confocale in vivo ?

L’imagerie confocale est une technique de microscopie optique à très haute résolution qui utilise un faisceau laser pour explorer le tissu couche par couche. En éliminant la lumière hors foyer elle produit des images nettes et tridimensionnelles à l’échelle cellulaire. Dans sa version in vivo, elle permet d’observer directement les structures du tissu vivant sans prélèvement ni fixation. Appliquée à la recherche en acupuncture elle rend possible le suivi en temps réel de la microcirculation, du mouvement cellulaire et du remodelage du collagène au point d’insertion de l’aiguille.

Figure 2. Appareil d’imagerie confocale in vivo (Optiscan ViewnVivo B30) utilisé dans l’étude de Xiong et al. (2025).

L’ensemble comprend le boîtier de commande et d’analyse optique (à gauche) qui génère le faisceau laser et traite les signaux collectés, l’unité informatique avec écran et logiciel d’acquisition (au centre) pour le pilotage et la visualisation en temps réel et la plateforme expérimentale équipée d’une sonde flexible (à droite) permettant l’observation directe des tissus vivants ainsi que l’acquisition de séquences vidéo ou de coupes optiques successives (Z-stacks).

Les techniques de transparisation optique des tissus (tissue clearing), comme la méthode CUBIC que nous avons présentée dans un article précédent sur la visualisation 3D du point Guanyuan (4VC), avaient ouvert la voie à l’exploration anatomique fine des points d’acupuncture [4]. L’imagerie confocale in vivo prolonge cette approche en y ajoutant la dimension temporelle permettant de suivre en continu les réactions du tissu vivant au moment même de la stimulation.

L’étude présentée ici a, avant tout, une portée exploratoire. Elle démontre la faisabilité et la fiabilité de l’application de l’imagerie confocale in vivo à l’acupuncture. Il faudra en suivre les développements.

L'essentiel à retenir

Dr Johan Nguyen

Références

Mots-clés : Points